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Issue
J. Chim. Phys.
Volume 95, Number 4, April 1998
Page(s) 895 - 897
DOI http://dx.doi.org/10.1051/jcp:1998220
DOI: 10.1051/jcp:1998220


J. Chim. Phys. Vol. 95, N°4  p. 895-897

Approche morphologique de la fragmentation de l'ADN radio-induite par immunomarquage anti-poly (ADP-ribose) polymérase (PARP) : étude de cultures d'oligodendrogliomes

P. Varlet1, F. Beuvon1, P. Cervera1, D. Averbeck2 and C. Daumas-Duport1

1  CH Saint-Anne, Laboratoire d'Anatomie Pathologique, 1 rue Cabanis, 75014 Paris, France
2  Institut Curie, UMR 218, 75005 Paris, France

Abstract
Poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) is a nuclear enzyme encompassing two zinc finger motifs which specifically binds to radiation induced DNA strand breaks. We develop a new immuno-labelling of poly ADP-ribose which coupled together with the immunodetection of cells in cycle with MIB1, permits to detect and quantify the DNA fragmentation induced by radiations (Cesium137). This method, applied to organotypical cultures of human oligodendroglioma, submitted to radiation, a dose dependant nuclear signal. This one increased significantly in the presence of a radiosensitizer like iododeoxyuridine (IUDR 5 g/ml). This poly ADP-ribose immunodetection can be useful, to detect furtherly the individual radiosensitivity of human glioma.

Résumé
Les protéases "ICE-like" ou caspases, sont les homologues humaines du produit du gène ced-3 du ver Caenorhabditis elegans et sont activées lors des étapes précoces de l'apoptose. L'objectif de ce travail vise à déterminer dans quelle mesure l'inhibition de l'une d'entre elles, la caspase-3 est susceptible de modifier la sensibilité des cellules vis-à-vis de l'apoptose radioinduite. Des lymphocytes spléniques murins irradiés en présence de Ac-DVED-CHO un inhibiteur spécifique de la caspase-3 présentent un taux de particules hypodiploïdes radioinduites bien inférieur à celui des contrôles et une diminution drastique de la fragmentation internucléosomale de l'ADN. Toutefois, ni l'externalisation des phospholipides anioniques, autre marqueur spécifique de l'apoptose, ni la viabilité ne sont affectées.


Key words: poly (ADP-ribose) polymérase -- oligodendrogliome -- rayonnement ionisant -- immunohistochimie
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© EDP Sciences 1998