Use of the comet assay to measure DNA damage in cells exposed to photosensitizers and gamma radiation

¹ Département de Recherche Fondamentale sur la Matière Condensée, SCIB/Laboratoire “Lésions des Acides Nucléiques", CEA/Grenoble, F-38054 Grenoble Cedex 9, France
² LBSO/LCR7 No. 8M, Faculté de Pharmacie, Université Joseph Fourier, F-38700 La Tronche, France

Abstract

We used the comet assay associated with DNA-glycosylases to estimate DNA damage in cells exposed to gamma irradiation or photosensitized either with methylene blue or orange acridine. A calibration performed using irradiation allowed the measurement of the steady-state level and the yield of 8-oxodGuo as well as strand breaks and alkali-labile sites.

Résumé

Nous avons utilisé la méthode des comètes associée à des ADN-glycosylases, pour estimer les dommages de l'ADN dans des cellules après l'exposition à un rayonnement gamma ou après photosensibilisation par le bleu de méthylène ou l'acridine orange. Une calibration de la méthode des comètes a permis de mesurer le niveau basal et les taux de formation de 8-oxodGuo ainsi que le nombre de cassures de brins et de sites alcali labiles.