Studies on the biosynthesis of deoxyribonucleic acid

Department of Biochemistry, The University, Glasgow, IV. 2. Scotland.

Résumé

On décrit l’existence dans les tissus de mammifères d’un enzyme qui forme des polydeoxyribonucleotides à partir des quatre deoxyribonucleoside-5’-triphosphates. Alors que l’enzyme se trouve dans les extraits de la plupart des tissus, les tissus proliférants sont plus actifs que les autres.

L’enzyme des cellules de tumeurs ascitiques est très sensible aux changements de concentration ionique ; il est inhibé par les fortes concentrations d’ions Mg₊⁺, K⁺ et Na⁺. L’ADN non-dénaturé amorce faiblement la réaction, mais un traitement préliminaire par la chaleur de l’ADN, ou un traitement par la déoxyribonucléase augmente l’activité d’amorçage de plusieurs fois. Le traitement de l’ADN par de faibles quantités de déoxyribonucléase suivi d’un chauffage provoque un amorceur qui possède onze fois l’activité de l’ADN non-dénaturé.

L’activité de la polymerase de l’ADN extrait de foie normal est très faible et les extraits de foie de rat en régénérescence sont plus actifs. Il a été montré que les extraits de foie de rat normal inhibent la polymerase de foie de rat en régénération, de thymus de veau et de cellules de tumeurs ascitiques. Cette inhibition n’est pas due à la destruction des deoxyribonucleoside-5’-triphosphates, elle ne semble pas être due à une lésion de l’ADN amorceur. Une fraction protéinique, douée d’activité inhibitrice, a été purifiée plusieurs fois à partir d’extraits de foie de rat normal.

Des essais en vue de détecter la polymerase dans des noyaux isolés des cellules de tumeurs ascitiques et de tissus de lapin dans CINa 0,9 % et sucrose 0,25 M n’ont pas abouti et les mesures de l’activité de la polymerase dans des homogénats de tissus de thymus de lapin lyophilisés, de noyaux partiellement purifiés et de noyaux purifiés provenant de ces homogénats ont montré une diminution sensible de l’activité spécifique si les noyaux sont purifiés. L’effet acquis laisse à penser que la polymerase serait absente des noyaux de cellule.