Interaction de la sérum albumine humaine avec les anions chlorure et chloracétate à 25 °C

Laboratoire des Interactions Moléculaires, Université des Sciences et Techniques du Languedoc, Place Eugène-Bataillon, 34060 Montpellier Cedex, Dijon.

Résumé

L’étude des interactions de la Sérum albumine humaine (SAH) et des anions chlorure et chloracétate a été effectuée à 25 °C. pour des pH inférieurs à 5, domaine où la protéine subit des modifications structurales importantes. Nous avons employé la méthode de variation des coefficients d’auto-diffusion mesurés par la technique du capillaire. Le titrage de la protéine a permis l’étude de l’interaction SAH-proton parallèlement à celle de l’anion. Des mesures de viscosité nous ont permis de relier l’interaction des anions et des protons à des modifications structurales.

Le nombre total de sites actifs de la SAH envers les anions chlorure et chloracétate est de 24 ± 1. Ils sont constitués par Sciasses de sites composées chacune de n₁ = 2 ± 1, n₂ = 5 ± 2 et n₃ = 17 ± 3 sites actifs.

Après avoir déterminé W (facteur de Debye-Huckel) empiriquement à partir des courbes de titrage, nous avons calculé les différentes constantes intrinsèques des diverses classes de sites; les constantes intrinsèques d’un même groupe sont du même ordre de grandeur en milieu chlorure et chloracétate.

Abstract

The interactions of HSA with chloride and chloracétate ions as functions of the self diffusion coefficient were studied in the pH range where the protein undergoes important structural modifications. These coefficients were measured using a capillary tube method. Protein titration was used to follow the prolon-HSA interactions which accompany the binding of anions. The relation between the structural modification and proton and anion binding was investigated by means of viscosity measurements.

The total number of binding sites for chloride and chlorace- late ions was found to he 24 ± 1. These sites could be divided into three classes, n₁, n₂ and n₃, each with 2 ± 1, 5 ± 2 and 17 ± 3 sites respectively.

The factor W (Debye Huckel coefficient) was determined empirically from the titration curves and used to calculate the intrinsic association constants, for the different classes of sites. Within the same class, intrinsic association constants for chloride and chloracétate were of the same order of magnitude.