Construction et mise au point d’un appareil de mesure de la polarisation de fluorescence. Exemple d’application à l’étude de modèles de membranes biologiques

(Centre de Recherches Paul-Pascal, Domaine Universitaire, 33405 Talence.), France.

Résumé

Dans ce mémoire est décrit un appareil de mesure de ia polarisation de fluorescence, qui permet la détermination quasi simultanée des rapports I_///I₀ et [math] des intensités des deux composantes de la lumière émise sur l’intensité d’un faisceau de référence. Grâce à ce dispositif, qui assure la stabilité du signal au cours du temps, et à la moyennisation automatique d’un grand nombre de mesures, il est possible d’obtenir avec une très bonne précision le taux de polarisation P, (ΔP ≤ 0,003) et l’intensité totale ([math]) de la lumière émise par un échantillon. De plus, l’uLilisation de cet appareil pour des études cinétiques peut être envisagée.

Un exemple d’application de la polarisation de fluorescence aux systèmes modèles de membranes biologiques est ensuite donné, par la mise en évidence, au moyen du 1,6-diphényl- 1,3,5-hexatriène, des transitions de phase de la dipalmitoyl- phosphatidylcholine et de la dimyristoylphosphatidylcholine.

Abstract

An apparatus for measuring the fluorescence polarization is described: the ratios I_///I₀ and [math] of the fluorescence intensities of the two polarized components to a reference intensity, proportional to that emitted by the exciting source, are determinated quasi simultaneously. This device, which ensures the stability of signals versus time, as also automatic repetitive measurements, allows to obtain the degree of polarization P and the total fluorescence intensity ([math]) with a good accuracy. Another advantage of this apparatus is that it can be used to perform kinetic measurements.

In the second part of this paper, the application of fluorescence polarization to membrane models is illustrated by studying the phase transitions of dipalmitoylphosphatidyl- choiine and dimyristoylphosphatidylcholine, using as probe the 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene.