Synthetic reactions with oligo- and poly-deoxyribonucleotides; non-enzymatic formation of phosphodiester bonds^(*)

Division of Nucleoprotein Chemistry, Sloan-Kettering Institute for Cancer Research, and Sloan-Kettering Division, Graduate School of Medical Sciences, Cornell University Medical College, New York, N. Y., U.S.A.

Résumé

Les polynucleotides sont d’abord préparés par des méthodes enzymatiques ou chimiques en utilisant des nucleosides phosphates hautement énergétiques ou activés chimiquement. Cet exposé analyse :

• 1)

  La formation de polynucléotides à partir de nucléotides ou d’oligonucléotides en présence de l’échangeur d’anion Ecteola, mais sans activation préalable ni utilisation d’enzyme.

• 2)

  L’incorporation non-enzymatique d’unités nucléotidiques dans le DNA en l’absence d’Ecteola.

Les produits obtenus par polimérisation à l’aide d’Ecteola dans le tampon phosphate 0,01 dilué et neutre, de la portion dialysable d’une préparation d’ADN de thymus de veau digéré par de la DNase ont un poids moléculaire moyen d’environ 10 000 lorsqu’on les examine par ultra-centrifugation ; parmi ces produits on en trouve de plus grande dimension. Par suite de ce traitement 20 % du matériel initial constitué par des nucléotides dialysables devient non dialysable contre des solutions salines diluées et concentrées. La cellulose ou les échangeurs de cations de cellulose ne catalysent pas la réaction. On a étudié les produits par des méthodes physiques et chimiques.

On a trouvé que lorsque les désoxyribonucléotides en particulier étaient mélangés au DNA pendant plusieurs jours dans une solution saline étendue, plusieurs unités nucléotidiques se rattachaient au DNA. L’examen chimique et physique des produits permet de penser que de nouvelles liaisons phosphodiester se sont formés.