Measurement of 2’-deoxyadenosine N1-oxide 5’-monophosphate in modified DNA, using capillary electrophoresis

Département de recherche fondamentale sur la matière condensée, service de chimie inorganique et biologique, laboratoire lésions des acides nucléiques, CEA Grenoble, 17 avenue des Martyrs, 38054 Grenoble cedex 9, France.

Abstract

Adenine N1-oxide is a DNA lesion resulting from indirect effect of solar UV radiation through the specific oxidation by hydrogen peroxide under nonradical conditions. This damage is usually measured using ³²P-postlabeling method, which however cannot be used for routine analysis. We propose herein an assay based on capillary zone electrophoresis which allows a rapid evaluation of the level of modified bases in DNA exposed to oxidative stress.

Résumé

L’adénine-N1-oxyde est une lésion de l’ADN résultant de l’effet indirect du rayonnement solaire par action du peroxyde d’hydrogène sur l’adénine. Son dosage dans l’ADN, jusqu’ici obtenu par la méthode du post-marquage radioactif était long et fastidieux. Nous proposons ici l’utilisation de l’électrophorèse capillaire, dont la sensibilité et la facilité de mise en œuvre permettent une évaluation rapide du taux de modification d’un ADN.