Interaction de la sérum albumine humaine et des anions trichloracétate et chlorure étudiée par autodiffusion

Laboratoire des Interactions Moléculaires, Université des sciences et techniques du Languedoc, Place Eugène-Bataillon, 34060 Montpellier Cedex, France.

Résumé

Nous avons utilisé la variation des coefficients d’autodiffusion pour étudier l’interaction entre les anions trichloracétatc et chlorure et la sérum albumine humaine (SAH). Pour le premier, la liaison des anions a été confirmée par dialyse d’équilibre.

Le domaine de pH exploré étant celui où la macromolécule subit habituellement la transition [math] et l’expansion de la tonne F, l’étude des interactions a été complétée par des mesures de coefficient d'autodiffusion de la protéine, de viscosité et de titrage des solutions protéiniques.

Nous avons pu montrer que, contrairement à ce qui est obtenu lors de l’interaction entre les anions chlorure, chloracétate et la SAH, pour une torce ionique suffisamment élevée, la macromolécule reste sous la forme N compacte en solution trichloracétique.

Nous avons déterminé deux catégories de sites susceptibles de fixer l’ion trichloracétate : n₁ = 10 et n₂, = 50, ainsi que les constantes de liaison correspondantes : K1 = 1 000 et [math] = 7. Les constantes thermodynamiques du système Cl^- — SAH ont été déterminées.

Abstract

The variation of tile self-diffusion coefficients and the equilibrium dialysis were employed for studying the interactions between trichloracétate ion and human serum albumin (HSA) in the pH range where the protein generally undergoes tlie transition [math] and the expansion of the F form. Protein self-diffusion coefficients, viscosity measurements and protein titration were investigated in the same pH range.

The results obtained suggest that the structural changes of the protein appear to he suppressed for a sufficient ionic strengh in trichloracétate medium and that the N form of HSA was stabilized.

Two different binding sites were determined, n₁ = 10 and n₂ = 50 with the corresponding intrinsic binding constants k₁ = 1 000 and k₂ = 7.

In HSA — Cl- system, the thermodynamic constants are determined.