Une nouvelle méthode spectrophotométrique destinée à l'étude des réactions photosynthétiques

Institut de Biologie Physico-Chimique 13, rue Pierre et Marie Curie 75005 Paris, France.

Résumé

Une nouvelle méthode spectrophotométrique destinée à l'étude des variations d'absorption photoinduite sur différents matériels photosynthétiques a été mise au point.

La lumière détectrice est distribuée sous forme d'une série d'éclairs monochromatiques de courte durée (2μs) permettant d'échantillonner le niveau d'absorption à des temps variables après l'illumination actinique. L'analyse d'une cinétique de relaxation induite par un éclair actinique peut être effectuée dans un large domaine de temps (2μs-100 sec) et en une seule expérience à l'aide d'une série d'éclairs détecteurs convenablement distribués et dont l'effet actinique intégré est négligeable.

Pour éliminer les fluctuations en énergie des éclairs détecteurs, l'appareil comporte un faisceau de mesure et un faisceau de référence et fonctionne en ratiomètre. Il est ainsi possible d'atteindre un niveau de bruit de fond de l'ordre de ± 4.10^–5 de la lumière transmise. La sensibilité de la méthode a été améliorée en augmentant l'efficacité de collection de la lumière diffusée par les suspensions biologiques.

Des exemples d'application de la méthode à l'étude des variations d'absorption photoinduite sur des algues Chlorella sont présentés.

Abstract

A new spectrophotometric method has been developed to measure the absorption changes induced by short actinic flashes on different photosynthetic material.

The absorption level is measured during each of a series of 2μs monochromatic flashes given at various interval after the actinic flashes. This method allows analysis in a single experiment of relaxation kinetics over a wide range of time (2µs-100 sec) without any significant actinic effect of the detecting light. In order to eliminate the fluctuation in energy of the detecting flashes, the light energy transmitted through a measuring cuvette is divided by that transmitted through a reference cuvette, which permit a lowering of the noise level to a value of ± 4.10^–5 of the transmitted light. The sensitivity of the method has been improved by increasing the collection of the light scattered by the biological suspension.

Application of the method for the measurement of the absorption changes induced by short flashes on Chlorella is presented.