Oriented bilayers of a proteolipid complex, Annexin V – phospholipids, for solid state NMR analyses

Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale, CNRS, 118 route de Narbonne, 31062 Toulouse, France

Abstract

We were able to obtain oriented bilayers in the presence of annexin V (35 kDa) and to measure structural and dynamic parameters. NMR results obtained so far show that annexin does not affect the structure of the membrane but modifies the dynamics of the phospholipids (T_2e decrease). Our new method to prepare oriented biological samples, based on the preparation of small unilamellar proteolipid vesicles in biological buffers, should be suitable for any membrane protein – phospholipid complex and for solid state NMR or neutron diffraction experiments.

Résumé

La préparation de petites vésicules protéo-lipidiques dans un tampon physiologique, nous a permis d'obtenir des bicouches orientées en présence d'annexine V (35 kDa) et de mesurer les paramètres structuraux et dynamiques de ce complexe protéolipidique. Les résultats obtenus par RMN du solide montrent que l'annexine n'affecte pas la structure en bicouche de la membrane mais modifie la dynamique des phospholipides (diminution du temps de relaxation T_2e). Cette nouvelle méthode de préparation d'échantillons orientés peut être applicable à tout complexe protéine-phospholipides pour des études par RMN à l'état solide ou par diffraction des neutrons.