Lipid dynamics in the annexin V - membrane complex

Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale, CNRS, 205 route de Narbonne, 31077 Toulouse cedex, France

Abstract

The influence of annexin V on the lateral diffusion of phosphatidylcholine (PC) and phosphatidylserine (PS) were previously investigated by Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP), while its effects on acyl chain motions were studied by ²H NMR spectroscopy and fluorescence polarisation (Saurel et al., 1998, Biochemistry, 37, 1403-1410; Cézanne et al., 1999 Biochemistry, 38, 2779-2786). In the present paper, the lipid polar head's orientations were analysed, by 2H NMR spectroscopy on oriented bilayers labelled with DMPC- αβ-d₄ and POPS- αβ-d₃. All the results were analysed, taking into account the time constant of each method, and a detailed description of the lipid dynamics in this proteolipidic complex is proposed.

Résumé

L'effet de l'annexine V sur la diffusion latérale des lipides a été étudié précédemment par fluorescence (photoblanchiment), alors que ses effets sur la dynamique des chaînes acyls ont été analysés par polarisation de fluorescence et RMN du deutérium (Saurel et al., 1998, Biochemistry, 37, 1403-1410 ; Cézanne et al., 1999, Biochemistry, 38, 2779-2786). Dans cet article, l'orientation des têtes polaires des PC et des PS a été analysée par RMN du deutérium sur bicouches orientées marquées avec du DMPC- αβ-d₄ et du POPS- αβ-d₃. L'ensemble des résultats a été analysé en tenant compte des temps caractéristiques de chaque méthode, et nous conduit à proposer une description globale de la dynamique des lipides dans ce complexe protéolipidique.