Structure determination of a 2"-O-(α-D-glucopyranose) isomaltotriose by proton and carbon-13 NMR

SOUS-TITRE

¹ Centre de Recherches sur les Macromolécules Végétales, CNRS, laboratoire associé à l’Université Joseph-Fourier, BP 53 X, 38041 Grenoble Cedex, France ;
² Bioeurope, BP 4196, 4, impasse Didier-Daurat, 31031 Toulouse Cedex, France.

Abstract

The glucosyltransferases from Leuconostoc mesenteroides are known to catalyze the transfer of the D-glucosyl group of sucrose onto sugars, commonly named acceptors. We investigated in the present work the transfer of the glucose moiety of sucrose onto isomaltose acceptor catalyzed by the glucosyltransferases from Leuconostoc mesenteroides. Several oligosaccharides were produced, isolated, fractionated by HPLC and characterized.

The primary structure of the tetrasaccharide has been determined as that of 2"-0-(α-D- glucopyranose) isomaltotriose by n.m.r. spectroscopy, using homo- and heteronuclear, shift correlated, two dimensional and n.o.e. difference experiments. This chemical structure was corrobored by ¹³C spin lattice relaxation time measurements (T₁) indicating that internal units B and C are notably less flexible than A and D termini units, C being the less mobile.

Résumé

Les glucosyltransferases de Leuconostoc mesenteroides sont connues pour catalyser le transfert d’une unité glucose sur des sucres appelés accepteurs. Dans cet article, nous avons étudié le transfert du résidu glucosyl du sucrose sur l’isomaltose comme accepteur, en présence de glucosyltransférases de Leuconostoc mesenteroides. Plusieurs oligosaccharides ont été obtenus, isolés, fractionnés par HPLC et caractérisés. La structure primaire du tétrasaccharide a été déterminée par r.m.n. 1D et 2D du proton et du carbone 13 comme étant le 2"-0-(α-D -glucopyranose) isomaltotriose. Cette structure est corroborée par les valeurs des temps de relaxation des ¹³C qui indiquent que les unités internes B et C sont moins flexibles que les unités des extrémités A et D.