Fluorescence studies of the binding of two natural alkaloids (cinchonine and cinchonidine) with β-lactoglobulin⁺

¹ Institui de topologie et de dynamique des systèmes de l'université Paris 7 - Denis-Diderot, associé au CNRS (URA 34), 1, rue Guy-de-la-Brosse, 75005 Paris, France.
² On leave from the Département de chimie, faculté des sciences, université CA-Diop, Dakar, Sénégal.

Abstract

The binding to the transport protein β-lactoglobulin (β-LG) of the natural alkaloids stereoisomers, cinchonine ana cinchonidine, has been investigated in a pH 7.5 buffer solution by fluorescence spectroscopy. The large decrease of β-LG fluorescence brought about by addition of cinchonine and cinchonidine has been correlated to an increase of the complex emission, indicating an efficient energy transfer. The complex affinity constants have been evaluated. The results clearly show that only one binding site is affected in the dimeric protein and ţhat the affinity of cinchonine for β-LG is much more important than that of cinchonidine.

Résumé

La formation d'un complexe de la protéine de transport (β-LG) avec les alcaloïdes naturels stéréoisomères, cinchonine et cinchonidine, a été étudiée en solution tampon de pH 7,5 par spectroscopie de fluorescence. La décroissance importante de l’intensité de fluorescence de la β-LG provoquée,. par l'addition de cinchonine et de cinchonidine, a été corrélée avec une augmentation de l’émission du complexe formé, ce qui indique un transfert d'énergie efficace. Les constantes d'affinité des complexes ont été mesurées. Les résultats montrent clairement qu'un seul site de complexation est concerné dans la protéine dimère et que l'affinité de la cinchonine pour la β-LG est beaucoup plus importante que celle de la cinchonidine.