Péroxydation des lipoprotéines de basse densité (LDL) par divers radicaux libres oxygénés produits par radiolyse gamma

¹ Laboratoire de Biochimie, Hôpital de la Salpêtrière, 47, bd de l’Hôpital, 75651 Paris Cedex 13, France.
² Laboratoire de Chimie physique, CNRS URA 400, Université Paris V, 45, rue des Saints-Pères, 75270 Paris Cedex 06, France.

Résumé

La lipidoperoxydation des LDL (1,5 g.l^-1), en solution aqueuse tamponnée à pH 7, a été étudiée par radiolyse gamma, in vitro, en sélectionnant les radicaux libres oxygénés OH^• ou [math].L’action de doses d’irradiation croissantes (de 0 à 800 Gy, débit de dose = 3,4.10^-2 Gy.s^-1) a été suivie en mesurant : 1) la formation de dialdéhyde malonique (MDA), 2) la disparition de la vitamine E et 3) l’évolution de la mobilité électrophorétique sur gel d’agarose. Dans tous les cas étudiés, la disparition de la vitamine E précède toujours l’apparition du MDA, en accord avec le rôle protecteur que joue la vitamine E vis-à-vis des chaînes de peroxydation lipidique. En l’absence d’oxygène, les radicaux OH^• sont de faibles initiateurs de la peroxydation lipidique (G(MDA) ≃ 10^-8 mol.J^-1), alors qu’en présence d’oxygène le rendement initial d’apparition du MDA est multiplié par 10 (G(MDA) ≃ 10^-7 mol.J^-1). Quant aux radicaux [math], ils n’initient, comme prévu, qu’une très faible peroxydation lipidique (G (MDA) ≃ 10^-8 mol.J^-1). La mobilité électrophorétique croît de manière concomitante avec la formation de MDA.

Abstract

In vitro studies of lipid peroxidation of human low density lipoproteins (LDL 1,5 g.l^-1) in aqueous solutions buffered at pH 7 have been investigated using steady state radiolysis to produce selectively oxygen-centred free radicals OH^• or [math] The effects of increasing doses (up to 800 Gy, dose rate = 3,4.10^-2 Gy.s^-1) have been followed by measuring 1) the formation of malondialdehyde (MDA), .2) the disappearance of vitamin E, and 3) the evolution of the electrophoretic mobility on agarose gel. In each case studied, vitamin E was consumed in a dose-dependent manner before the onset of lipid peroxidation, in agreement with the antioxidant properties of this vitamin. In the absence of oxygen, OH^• radicals produced only very limited peroxidation (G(MDA) ≃ 10^-8 mol.J^-1), whereas in the presence of oxygen the initial G value of MDA was enhanced by a factor of 10 (G(MDA) ≃ 10^-7 mol.J^-1). Superoxide anions induced, as expected, little lipid peroxidation (G(MDA) ≃ 10^-8 mol.J^-1). The electrophoretic mobility increased with the degree of lipid peroxidation measured by the formation of MDA.