Analyse, par différents marqueurs, de la peroxydation des HDL humaines initiée par divers radicaux libres dérivés de l'oxygène

¹ Laboratoire de chimie physique, CNRS, URA 400, université Paris-V, 45, rue des Saints-Pères, 75270 Paris Cedex 06, France ;
² laboratoire de biochimie, hôpital de la Salpêtrière, 47, bd de l'Hôpital, 75651 Paris Cedex 13 France.

Résumé

Des solutions de HDL (lipoprotéine de haute densité) humaine, en milieu aqueux tamponné à pH 7 (tampon phosphate 10^-2mol.l^-1) saturées de N₂O ou O₂ ont été irradiées avec des doses comprises entre 0 et 800 Gy (débit de dose 2,7 x 10^-2 Gy/s). L'action des radicaux libres OH• ou [math] générés par radiolyse gamma à été suivie en mesurant : 1/ la formation de substances réagissant avec l'acide thiobarbiturique (SRTBA), 2/ la disparition de la vitamine E, 3/ l'apparition de diènes conjugués et 4/ l'évolution de la fluorescence différentielle émise.

Les rendements initiaux de disparition de la vitamine E sont du même ordre de grandeur(~10^-7 mol.J^-1) dans les solutions saturées de gaz N₂O ou O₂. Les rendements initiaux de formation de SRTBA diffèrent légèrement lorsque le phénomène d'oxydation est initié par les radicaux OH• (G(SRTBA)= (0,26 ±0,02) x 10^-7 mol.J^-1) ou par les radicaux [math]. De plus, on note des différences importantes tant au niveau des faibles doses d'irradiation qu'au niveau des fortes doses selon la nature des radicaux initiateurs. Ces résultats sont comparés à ceux obtenus par ailleurs, avec les LDL (lipoprotéine de basse densité) dans des conditions expérimentales similaires.

Abstract

Aqueous solutions of human HDL (high density lipoprotein) buffered at pH 7 (sodium phosphate 10^-2 mol.l^-1) and saturated with N₂O or O₂ have been irradiated with increasing doses between 0 and 800 Gy (dose rate 2,7 x 10_-2 Gy/s). The action of OH• or [math] free radicals generated by gamma radiolysis has been followed by several parameters: 1/ formation of thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS), 2/ decrease of endogenous vitamin E, 3/ formation of conjugated dienes and 4/ appearance of a differential fluorescence.

Initial irradiation yields of vitamin E decrease are of the same order of magnitude (-10^-7 mol.J^-1) in N2O or O2 saturated solutions. Initial irradiation yields of TBARS formation are slightly different when the oxidation process is initiated by OH• free radicals (G(TBARS) = (0,26 ± 0,02) x 10^-7 mol.J^-1) or by [math] free radicals (G(TBARS) = (0,5 ± 0,05) x 10^-7 mol.J^-1). Moreover, according to the nature of the free radicals, important differences can be noticed, occuring whether irradiation doses are weak or high. These results are compared to those obtained with LDL (low density lipoproteins) in similar experimental conditions.